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一、粪便检查
1.直接涂片法 加1滴生理盐水于载玻片中央，用竹签挑取少量粪便与生理盐水混匀，厚度以能透见纸上5号字体为宜，加盖玻片，镜检。主要用于检查蠕虫卵及原虫活滋养体。连续涂片3张，可提高检出率。
2.碘液染色法 用碘液(碘化钾4g溶于100ml蒸馏水中，再加碘2g，溶解后即可应用)代替生理盐水作涂片，方法同直接涂片法。主要用于查原虫包囊，染色后包囊呈黄色或棕黄色，阿米巴包囊内糖原泡染成棕褐色。
3.厚涂片法(改良加藤法) 取50mg去渣粪便置载玻片上，盖以浸透甘油-孔雀绿溶液的亲水玻璃纸(22mm×30mm大小)，用橡胶塞轻压，使粪便均匀铺开，室温置30～60分钟后镜检。亲水玻璃纸须在甘油-孔雀绿溶液(甘油100ml，3%孔雀绿1ml，水100ml)浸泡至少24小时，显绿色即可。http://www.parasitology.com.cn
4.浓集法 常用沉淀或浮聚的原理达到浓集虫卵或包囊的目的。
(1)自然沉淀法：又称水洗沉淀法。取粪便20～30g置烧杯内，加水成混悬液，经两层纱布或金属筛(40～60孔)，滤入尖底量杯内，并加清水至杯口，静置25分钟，倾去上液，重新加满清水，每15～20分钟换水一次(共3～4次)，直至上液清晰为止。最后倾去上液，取沉渣镜检。也可将上述滤渣粪液离心(2000r/m)1～2分钟，倒上去液，注入清水再离心，并反复3～4次，使上液澄清后，倾之，取沉渣镜检，此法称为离心沉淀法。
(2)离心沉淀法：用铜筛或双层纱布将粪便混悬液过滤去渣后置于离心管中，以1500～2000r/m离心1～2分钟，弃上液，加入清水混匀，再离心沉淀，重复3～4次，直至上液清晰。最后弃上液，吸取沉淀物镜检。
(3)汞碘醛离心沉淀法：取粪便1g，加10ml汞碘醛溶液混匀，用铜筛或双层纱布过滤后置于15ml离心管中，加入乙醚4ml，充分摇匀，静置2分钟，1600r/m离心2分钟使混悬液分成乙醚、粪渣、汞碘醛及沉淀物四层，吸出上面，取沉淀物镜检。
汞碘醛溶液的配制：①汞醛液：硫柳汞酊(柳汞1g溶于1 000ml70%酒精中)200 ml，40%甲醛25ml，甘油5ml，蒸馏水200ml。②卢戈氏碘液：碘5g，碘化钾10g，蒸馏水100ml。该液保存在棕色瓶内，且不宜超过1周。
取汞醛液9.4ml，卢戈氏碘液0.6ml，混合即用。检查时临时配制。
(4)饱和盐水浮聚法：主要用于检查钩虫卵。用竹签取黄豆粒大小粪便放入浮聚瓶或青霉素小瓶，加少量饱和盐水调匀，加入饱和盐水至瓶口，使液面高于瓶口，但不溢出，上盖一载玻片，静置15分钟后，将载玻片提起并迅速翻转，及时镜检。
(5)硫酸锌离心浮聚法：取粪便约1g，加10～15倍的水，充分搅碎、混匀，用铜筛或双层纱布将粪便混悬液过滤去渣后置于离心管中，以1500～2000r/m离心1～2分钟，弃上液，加入清水混匀，再离心沉淀，重复3～4次，直至上液清晰。最后倒去上液，在沉渣中加入比重1.18的硫酸锌液(33%的溶液)，调匀后再加硫酸锌溶液至离管口1cm处，离心1分钟。用金属环取表面粪液置于载玻片上，加碘液一滴，盖上盖片即可镜检。
5.钩蚴培养法 取口径1cm、长10cm的试管1支，加入冷开水1ml。将滤纸剪成与试管等宽，但稍长于试管的T字型纸条，用铅笔将受检者姓名或编号标记于横条处。用竹签取黄豆大小的粪便涂于滤纸条中段，再将纸条插入试管，下端浸泡于水中，但粪便不要接触水面。在20～30℃条件下培养，3天后，肉眼或用放大镜观察试管底部水中有无乳白色蛇样运动的钩蚴。如为阴性，应继续培养观察至第5天。培养期间注意每天沿管壁补充冷开水，以保持水面。http://www.parasitology.com.cn
6.毛蚴孵化法 将沉淀法处理后的粪便沉渣置于三角瓶内，加清水至瓶口处，25℃孵育24小时，以内眼或放大镜观察瓶颈水面下有无梭状白色小点(毛蚴)呈直线运动。必要时可吸出毛蚴镜检。
二、肛门外检查蛲虫卵
1.透明胶纸法 用长约5cm，宽约2cm的透明胶纸粘压肛周皮肤，取下胶纸，将有胶面平贴玻片上，镜检。本法检查蛲虫卵以清晨起床前进行为宜。
2.棉签拭子法 取一棉拭子蘸生理盐水，并挤出多余盐水，在肛门皱褶处擦拭之。然后将棉拭子在生理盐水小试管中充分振荡，经沉淀后，取沉渣镜检。或将棉签在饱和盐水中充分振荡，用浮聚法检查。http://www.parasitology.com.cn
三、血液检查
1.检查疟原虫 取患者外周血(耳垂或手指)制成血涂片，经染色后镜检。
(1)血片制作：常用厚薄血片法。取一洁净载玻片，以其右端1/3处蘸血一滴，用推片的一角，将血滴自内向外摊开，涂成直径1cm的厚血薄；同时在载玻片1/3与2/3交界处取血一小滴，将推片的一端置于血滴之前，待血液沿推片端缘扩散后，自右向左推成薄血膜。推片和载片间的角度保持30～45度较适宜。
(2)血片染色：常用姬氏染剂(Giemsa’s stain)或瑞氏染剂(Wright’s stain)。
1)姬氏染色法：此法染色效果好，但费时。
染液配制：姬氏染剂粉1g，甲醇50ml，甘油50ml。将姬氏染粉置研钵中，加少量甘油充分研磨，直至50ml甘油加完，倒入棕色瓶内，分数次用甲醇冲洗研钵内甘油染液，倒入瓶内，直至50ml甲醇用完为止，塞紧瓶塞，充分摇匀，置65℃温箱内24小时或室温内一周，过滤后备用，此即姬氏染液原液。http://www.parasitology.com.cn
缓冲液的配制：可用0.07mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)液和0.07mol/L磷酸二氢钾(KH2PO4)液配制。取磷酸氢二钠9.464g和磷酸二氢钾9.073g分别溶于1000ml蒸馏水中，装瓶，备用。用时，按不同比例配成不同的pH(见下表)。
缓冲液的配制
染色方法：先用小玻棒蘸甲醇在薄血膜上轻轻抹过，使血膜固定，但厚血膜在固定前须先溶血，即用滴管滴水于厚血膜上，待血膜呈灰白色时，将水倒去，晾干。用pH7.0～7.2的缓冲液，按1∶20比例将姬氏染液稀释。用蜡笔划出染色范围，将稀释的染液滴于已固定的厚薄血膜上，染色半小时(室温)，再用缓冲液冲洗。晾干血片后镜检。
2)瑞氏染色法：此法简便快速，适用于临床诊断。
染液配制：瑞氏染剂粉0.1～0.5g，甲醇97ml，甘油3ml。将染粉加甘油研磨，加少量甲醇再研磨，倒入棕色瓶，分数次用甲醇冲洗研钵内染液，倒入瓶内，直到甲醇用完为止。摇匀，24小时后过滤，经1～2周后再过滤，备用。
染色方法：薄血膜不须先固定，而厚血膜须先溶血。染色时滴加染液1分钟，加等量蒸馏水混匀，染色3～5分钟，水洗，待干，镜检。
2.检查微丝蚴
(1)新鲜血片法：宜在晚上10时至次晨2时采用外周血1～2滴，置玻片中央，加盖片后镜检。如有微丝蚴，可见呈蛇形运动的虫体。
(2)厚血片法：取血3大滴，涂成均匀的厚血膜，晾干后加蒸馏水溶血，水洗，干后用甲醇固定，染色，镜检。
四、排泄物或分泌物检查
1.痰检 查肺吸虫卵等。
(1)直接涂片法：取新鲜痰液立即作涂片，加盖片后镜检。
(2)浓集法：收集24小时痰液，加等量10%NaOH溶液，混匀后放入37℃温箱2小时，使痰液消化成稀液状。1500r/min，离心10分钟，弃上液，取沉渣涂片镜检。
2.尿 先离心，后取沉渣镜检。对乳糜尿，需加等量乙醚，用力振摇，使脂肪溶于乙醚，吸去脂肪层，离心，取沉渣镜检微丝蚴。
3.鞘膜积液 直接涂片法检查，也可加水稀释，离心沉淀，取沉渣检查微丝蚴。
4.阴道分泌物 主要用于检查阴道滴虫。多用直接涂片法，即载玻片上加生理盐水1滴，取阴道后穹窿分泌物作涂片，镜检。
5.十二指肠液和胆汁 检查肝吸虫卵、贾第虫等，可用直接涂片法或离心沉淀法等。
五、其他器官或组织检查
1.骨髓穿刺 检查杜氏利什曼原虫无鞭毛体，常用髂骨穿刺法。常规操作，涂片、染色、镜检。http://www.parasitology.com.cn
2.淋巴结穿刺 可选腹股沟淋巴结，常规操作。此外，有时可抽出丝虫成虫，或摘除淋巴结检查。
3.皮肤和肌肉活组织检查
(1)检查旋毛虫：从患者腓肠肌或肱二头肌取米粒大小肌肉，置于玻片上，加50%甘油1滴，盖上另一玻片，压紧后镜检。也可作病理切片镜检。
(2)检查猪囊尾蚴：取出皮下结节，剥去外层纤维被膜，将虫体置于两张玻片之间，轻压，镜检。
(3)检查肺吸虫：取出皮下结节，检查其中虫体。
(4)检查利什曼原虫：对患者可疑的皮肤病损部位，用无菌手术刀片，刮取组织液，涂片、固定、染色、镜检。http://www.parasitology.com.cn
4.肠黏膜检查 从肠黏膜病损组织中，可查到血吸虫卵及溶组织内阿米巴滋养体。
(1)检查血吸虫卵：用直肠镜取米粒大小肠组织，水洗后，夹于两张载玻片间，轻压镜检，可见活虫卵或死卵。也可作病理切片后检查。
(2)检查溶组织内阿米巴大滋养体：用乙状结肠镜从溃疡边缘或深层刮取溃疡组织，置于载玻片上，加生理盐水后覆盖片，轻压，镜检。
六、寄生虫人工培养
(一)溶组织内阿米巴培养
常用洛克氏(Locke)营养琼脂血清培养基。
1.培养基配制
(1)固体部分：牛肝浸膏3g，蛋白胨5g，琼脂15g，洛克氏液1 000ml。将上述成分混合放入1 000ml烧杯中，在沸水浴中溶解，分装于试管内，每管4～5ml，经15磅20分钟高压灭菌，放成斜面，冷却后置冰箱备用。
(2)洛克氏液：氯化钠8g，氯化钾0.2g，氯化钙0.2g，氯化镁0.01g，磷酸氢二钠2g，磷酸二氢钾0.3g，蒸馏水1 000ml。配制时将氯化钙、氯化镁另分装于小瓶，高压灭菌后再合并以免发生沉淀。洛克氏液每次配2 000ml。
(3)米粉消毒：将米粉分装入小瓶,经15磅20分钟高压灭菌后置70℃烤箱30分钟，备用。
(4)血清灭活：将兔(或人、牛)血清装入试管，置于56℃水浴中灭活30分钟，备用。 2.操作方法 在每培养管内加洛克氏液2ml、灭活血清0.5ml、米粉、青霉素和链霉素少许，置温箱内预热15分钟后，用白金耳挑取豌豆大粪便在培养管壁上研碎混于培养液中，如为黏液血便可取1ml混于培养液。置37℃温箱中经24～48小时后检查，若需保种，可每隔3～4天转种1次。
(二)阴道毛滴虫
常用肝浸膏汤培养基。http://www.parasitology.com.cn
1.培养基配制 肝(兔、牛)15g，蛋白胨2g，氯化钠0.5g，半胱氨酸盐酸盐0.2g，麦芽糖1g，蒸馏水100ml。将兔肝研碎放入100ml蒸馏水中，置冰箱过夜，次日煮沸半小时，用多层纱布过滤去渣，补足失去的水量，即成15%肝浸汤。再加入其他成分，加热溶解，调整pH至5.6～5.8，用滤纸过滤后，分装每管8ml，置37℃温箱24小时，检查无菌后，置冰箱备用。
2.操作方法 接种前每管加灭菌马血清1ml即可用。将阴道分泌物接种于培养基内置37℃温箱培养48小时，检查结果。如需保种每周可转种1次。http://www.parasitology.com.cn |
